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      實(shí)現ATP熒光檢測儀方法的三大要素

      發(fā)布日期:2016-11-23點(diǎn)擊次數:2349

      ATP熒光檢測法能在十幾秒內實(shí)現檢測,它大大提升了傳統細菌培養法24-48小時(shí)的工作效率,ATP方法的實(shí)現包括儀器、試劑和如何使用三大要素。

      1、儀器
      當儀器和試劑配合使用,整體靈敏度達到10-15~10-18摩爾ATP范圍時(shí),可以用于食品表明微生物檢測、手衛生檢測、餐飲器具潔凈度檢測、重點(diǎn)科室和重要活動(dòng)場(chǎng)所(如奧運會(huì )、世博會(huì )、人大政協(xié)會(huì )議等)物表檢測和衛生安保、食品加工器具、工作臺等關(guān)鍵控制點(diǎn)消毒結果檢測、醫療環(huán)境工作平臺(器械表面、內窺鏡、空調進(jìn)出氣口)衛生學(xué)即時(shí)評估,其實(shí)時(shí)監測數據能有效配合HACCP或GMP體系管理的要求;當儀器和試劑配合使用,整體靈敏度達到10-17-10-19摩爾ATP范圍時(shí),可用于更高要求的檢測如復用醫療器械清洗效果后評估和二次清潔處理評價(jià)、醫療用水檢測等。當然目前國外ATP設備和試劑的研發(fā)已經(jīng)向更高目標——可檢測到10-15~10-18摩爾水平的ATP努力,檢測試劑也可達到5個(gè)細菌細胞的水平。
       
      2、如何使用、取樣
      這是影響性和一致性的關(guān)鍵之一,可按照<<醫院消毒衛生標準附錄A(規范性附錄)采樣及檢查方法>>等規范要求再參照生物手持式ATP生物熒光檢測儀使用說(shuō)明書(shū)采樣、檢測、計算得出結果并記錄報告。采樣:(面積類(lèi))將ATP拭子采樣棒一支在物體表面或雙手指曲面從指跟到指端來(lái)回涂擦個(gè)兩次(一只手涂擦面積約30cm2),并隨之轉動(dòng)采樣拭子。(體積類(lèi))將ATP拭子采樣棒一支在待測液體充分浸濕。檢測:將拭子放入手持ATP儀,獲得被測樣本與細菌污染程度相對應的ATP生物熒光值,得出菌落數指標(詳見(jiàn)下文操作步驟及定標評價(jià))。另外天隆牌ATP儀自帶的 軟件能自動(dòng)將ATP熒光值儲存、處理和傳輸。
       
      3、結果判讀
      以上取樣、檢測全過(guò)程在1分鐘之內快速完成,比起24-48小時(shí)的傳統細菌培養優(yōu)勢巨大。細菌數量與細菌內所含ATP量有明確的相關(guān)性,通過(guò)檢測ATP含量可間接得出細菌數量,即ATP熒光檢測儀檢測結果顯示的發(fā)光值——相對照度單位RLU讀數與常規細菌培養法結果菌落數CFU具有很高的相關(guān)性,兩者沒(méi)有統計上的顯著(zhù)差異,因此這也是ATP熒光法細菌檢測的理論基礎。
      ATP生物熒光檢測儀利用生物化學(xué)發(fā)光技術(shù)將不可見(jiàn)的ATP濃度變?yōu)榭梢?jiàn)光輸出,從而以定量的結果間接顯示微生物數量,數值位于0-9999之間,以相對光單位RLUs表示。1RLUs約等于1fmol的ATP。RLU讀數可以與用戶(hù)設定的限值范圍相比較,提供的檢測。