水質(zhì)細菌檢驗箱用途：使用于師團在實(shí)驗室或野外條件下進(jìn)行水中細菌總數和和大腸菌群的檢驗。必要時(shí)還可進(jìn)行水中腸道致病菌（沙門(mén)氏菌屬和志賀菌屬）的檢驗。

性能：本箱操作簡(jiǎn)便、檢驗快速、結果。其中，水中細菌總數的檢驗采用 膜——營(yíng)養墊法。所用的培養基是新研制的無(wú)瓊脂培養基?？色@得與實(shí)驗室條件下常規標準平板法同樣的結果，水中大腸菌群的檢驗采用 膜——營(yíng)養墊法。所用的培養基是新研制的改良遠藤培養基，比普通的遠藤氏培養基能獲得更加滿(mǎn)意的檢驗結果。尤其是對水中損傷大腸菌的檢驗有較好的效果，這樣對消毒后水的檢驗能獲得更加安全可靠的結果；水中腸道致病菌——沙門(mén)氏菌屬和志賀氏菌屬的檢驗，采用常規和快速方法相結合。先用新研制的沙門(mén)氏菌屬——志賀氏菌屬通用增菌培養基增菌，然后用協(xié)同凝集試驗法進(jìn)行檢驗，24小時(shí)可初步報告結果，箱內還裝有新研制的沙門(mén)菌屬——志賀氏菌屬選擇培養基，必要市可進(jìn)行常規檢驗，并可獲得的檢驗結果。

整套裝置由采樣檢驗箱和選購部分-微型培養箱組成?？稍谝巴饣颥F場(chǎng)進(jìn)行采樣和檢驗，微型培養箱采用交、直流兩用電源可在沒(méi)有交流電條件下使用。

箱內的各種培養基忽然試驗器材用完后可隨時(shí)與億通電子有限公司補充。

使用本檢驗箱時(shí)首先將箱內酒精燈裝入酒精；酒精棉球瓶中裝入75%濃度的酒精。

• 水質(zhì)細菌檢驗箱采樣檢驗箱內器材和藥品

01、說(shuō)明書(shū)                       1份

02、DY—II型移液管              1支

03、DY—II型移液管吸嘴                      10支

04、接種棒                                   1支

05、金屬鑷子                                 1把

06、圓珠筆                                   1支

07、特種紅鉛筆                               1支

08、塑料培養皿                               20付

09、營(yíng)養肉湯培養基                           50管

10、改良遠藤培養基                           50管

11、沙門(mén)似—志賀氏菌屬增菌培養基             20管

12、協(xié)同凝集試劑                             1套

13、沙門(mén)氏—志賀氏菌增菌瓶                   3個(gè)

14、改良SS選擇瓊脂                          1瓶

15、克氏雙糖鐵培養基                         1瓶

16、水樣稀釋瓶（50ml）                       1個(gè)

17、酒精棉球瓶                               1個(gè)

18、微孔 膜（ 35mm 0.45um）                 3*100張

19、紙墊（ 47mm）                           7*40張

20、小杯（45-150ml）                         1個(gè)

21、酒精燈                                   1付

22、塑料注射器（20ml）                       1付

23、細菌過(guò)濾器                               1套

24、小毛巾                                   1條

25、火柴                                     1盒

26、塑帽試管                                 10支

• 水質(zhì)細菌檢驗箱采樣檢驗箱使用方法
  • 細菌中數檢驗方法
    • 1試驗準備：
  • 1水樣采集：采水容器事先滅菌或使用前用被檢水反復沖洗數次，然后采水。1.1.2移液管吸嘴的消毒：取下套在酒精燈上的支架，把支架小口端安裝在酒精燈口上， 杯放在支架上，倒入適量水，把吸嘴放入 杯內，煮沸5-10分鐘，備用。
  • 肉湯營(yíng)養紙墊制備：
  • 1將小皿用酒精棉球擦拭消毒，晾干后每皿加一片紙墊。

1.2.2取肉湯安瓶一支倒人小杯內，加入15mi蒸餾水或自來(lái)水煮沸溶解即為營(yíng)養肉湯。必要時(shí)?？梢灾苯佑瞄_(kāi)水沖泡溶解。

1.2.3取盛有紙墊小皿，每皿紙墊加營(yíng)養肉湯1.8-2.5ml（液體充盈程度以不淹沒(méi)濾膜為宜），即為肉湯營(yíng)養墊，備用。

• 3檢驗水樣：
  1.  ml注射器頭下，接頭處要嚴密。備用。

1.3.2細菌過(guò)濾器的處理：用燃著(zhù)的酒精棉球擦拭細菌過(guò)濾器的濾床和漏斗，待涼后，取一片濾膜，放在濾床上，裝上漏斗并擰緊。

1.3.3過(guò)濾水樣：生活飲用水為1ml，平分兩份，水源水可同時(shí)做原水1ml和稀釋50倍（箱內50ml小瓶放入1ml被檢水源水，家50ml冷開(kāi)水或無(wú)菌水）1ml兩個(gè)稀釋度，水樣加到濾器中后使之全部覆蓋膜面，然后抽濾至水干，將阻菌濾膜面朝上貼于肉湯營(yíng)養墊上。注意膜與營(yíng)養墊之間不要有氣泡。

1.4培養：37℃培養箱中培養24小時(shí)。

1.5菌落計數：計數膜上所有菌落數。

   細菌總數計數方法： 

   細菌總數（個(gè)/ml）=膜上的平均菌落數*稀釋倍數

• 6注意事項：

1.6.1 檢驗細菌總數過(guò)程中應盡量做到無(wú)菌操作。

1.6.2 每檢驗完一個(gè)水樣應用燃著(zhù)的酒精棉球燒灼漏斗和濾床后，再進(jìn)行檢驗第二個(gè)樣品。

1.6.3 每次試驗完畢，必須用干紗布把過(guò)濾漏斗和濾床等處擦干，以免腐蝕漏斗。

• 大腸菌群檢驗方法：

 2.1 試驗準備： 同細菌總數檢驗方法（1.1）

 2.2 遠藤營(yíng)養墊的制備：

  2.2.1 將小皿用酒精棉球擦拭消毒、晾干。每皿內加一片紙墊。

  2.2.2 取遠藤培養基安瓶一支，倒人小杯內，從酒精棉球瓶?jì)热〕雒耷驍D壓1-2滴酒精于培養基上使其剛好濕透，用玻棒攪勻，然后加15ml冷開(kāi)水或蒸餾水，搖勻溶解即為遠藤營(yíng)養墊。

  2.2.3 取盛有紙墊培養皿，每皿紙墊加遠藤培養液1.8-2.5ml（液體充盈程度以不淹沒(méi)濾膜為宜），即為遠藤營(yíng)養墊。

 2.3 檢驗水樣：

  2.3.1 細菌過(guò)濾器系統的組裝： 同細菌總數（1.3.1）  

  2.3.2 細菌過(guò)濾器系統的處理： 同細菌總數（1.3.2）

  2.3.3 過(guò)濾水樣：生活飲用水，應檢100-330ml，將被檢水樣倒入漏斗內至上刻度線(xiàn)處（100ml），檢驗330ml水量時(shí)，可過(guò)濾100ml后，再加100ml，直至濾完330ml，（如遇不易過(guò)濾水，可分2-3張膜過(guò)濾，分別貼于2-3個(gè)遠藤應營(yíng)養紙墊上，結果將膜上菌落數相加計算），將膜取下，小心貼于備用的遠藤營(yíng)養紙墊上。此時(shí)應注意勿使濾膜與營(yíng)養墊之間留有氣泡；檢驗未處理的水源水，取1ml水眼個(gè)，方法：同細菌總數，不同處僅把阻菌膜貼于遠藤營(yíng)養墊上。

2.4 培養：37℃培養箱中，培養18-24小時(shí)。

2.5 菌落計算： 計數膜上帶有金屬光澤或深黑色菌落。即為大腸菌數。 

        大腸菌群數計算方法：

大腸菌群數（個(gè)/升）=   膜上菌落數*稀釋倍數 *1000

                       被檢水樣體積(ml)

    2.6注意事項：同一水樣，同時(shí)檢驗細菌總數和大腸菌群時(shí)，可不處理濾器；其它項同細菌總數(1.6)

    3\水中腸道致病菌（沙門(mén)氏菌屬和志賀氏菌屬）檢驗方法：

     3.1 快速檢驗法：

      3.1.1增菌培養：

       3.1.1.1 直接增菌法：吸取待檢水樣10ml放入增菌瓶中，加入一小管（0.44g）沙門(mén)氏菌—志賀氏菌通用增菌培養基，充分振搖攪拌使其溶解。然后置37℃培養箱培養24小時(shí)。

       3.1.1.2濃縮增菌法：吸取待檢水樣100ml（更大或更小體積的水樣，視水質(zhì)而定）通過(guò)濾膜過(guò)濾，然后將阻菌濾膜取下，放入含有一小管（0.44g）沙門(mén)氏—志賀氏菌通用增菌培養基的10ml增菌液中（可用被檢水或無(wú)菌蒸餾水配制增菌液）置37℃培養箱，培養24小時(shí)。

      3.1.2 協(xié)同凝集試驗：具體步驟見(jiàn)“協(xié)同凝集試驗方法”。不同種類(lèi)的抗原液（即不同種類(lèi)的沙門(mén)氏菌、志賀氏菌增菌后的菌懸液）分別用對應的凝集試劑進(jìn)行協(xié)同凝集試驗，根據凝集與否判斷為陽(yáng)性或陰性。

      3.1.3 協(xié)同凝集試驗方法：

       3.1.3.1 取0.5ml生理鹽水將協(xié)同凝集試劑溶解，用手搖勻。

       3.1.3.2 取1滴凝集試劑于載玻片上，加一滴抗原液（經(jīng)增菌液培養24小時(shí)的水樣），充份混勻，1-3分鐘內觀(guān)察結果。

       3.1.3.3 結果判斷標準：

          懸液透明，出現 凝塊和顆粒為++++

          透明度稍差，出現 凝塊和顆粒為+++

          懸液半透明，凝塊和顆粒較少為++

          懸液不透明，有少量顆粒為+

          懸液渾濁，無(wú)顆粒出現為—

          ++以上為陽(yáng)性，+為可疑。

          對照：標準抗原作陽(yáng)性對照

          生理鹽水作陰性對照

      3.1.3.4 注意：協(xié)同凝集試劑應置低溫冷凍保存，有效期3年。

     3.2 常規檢驗方法：

      3.2.1 增菌培養：快速檢驗法中的直接增菌法和濃縮增菌法相同，其中志賀氏菌的增菌時(shí)間可以為16-18小時(shí)。

      3.2.2 平板分離：取上述經(jīng)增菌的沙門(mén)氏菌、志賀氏菌培養液，用接種環(huán)化線(xiàn)接種改良SS選擇瓊脂平板，置37℃培養箱中培養24小時(shí)。（如使用其它選擇培養基時(shí)，請注意對宋內氏痢疾桿菌是否良好，還是不生長(cháng)或生長(cháng)很差）。

      3.2..3 挑選菌落接種雙糖管：每個(gè)平板挑取5個(gè)以上可疑腸道病原菌菌落，接種于雙糖鐵或三糖鐵試管培養基中（將克氏雙糖鐵干燥培養基加水煮沸溶解后分裝于塑帽試管中，3ml，高壓蒸汽滅菌或水浴100℃15分鐘后放成高層斜面，凝固后即成）。置37℃培養箱中培養18-24小時(shí)。

        附：沙門(mén)氏菌屬和志賀菌屬在改良SS選擇瓊脂平板上的菌落特征：

        沙門(mén)氏菌屬，菌落呈無(wú)色透明或半透明或中間有黑心，直徑為1-3毫米（培養時(shí)間長(cháng)時(shí)，有的菌落中心略呈微粉色，但與紅色的大腸菌菌落不同）。

        志賀氏菌屬，菌落呈無(wú)色透明或半透明（宋氏痢疾桿菌的菌落中心有時(shí)略呈淺色），直徑1-3毫米。

       3.2..4 生化反應及血清學(xué)檢驗：

           沙門(mén)氏菌屬：在雙糖鐵或三糖鐵培養基上，底層變黃（分解葡萄糖產(chǎn)酸），產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣（如傷寒沙門(mén)氏菌不產(chǎn)氣），一般產(chǎn)H2S；斜面呈紅色（不分解乳糖）。用沙門(mén)氏菌多價(jià)血清或單價(jià)抗血清進(jìn)行凝集試驗，根據凝集與否判斷為陽(yáng)性或陰性。

           志賀氏菌屬：在雙糖鐵或三糖鐵培養基上，底層變黃（分解葡萄糖產(chǎn)酸），不產(chǎn)氣，無(wú)動(dòng)力，不產(chǎn)H2S；斜面呈紅色（不分解乳糖）。用志賀氏菌多價(jià)血清或單價(jià)血清進(jìn)行凝集試驗，根據凝集與否判斷為陽(yáng)性或陰性。

              中華人民共和國飲水衛生標準（細菌指標）